鰻魚及制品中15種喹諾酮類藥物殘留量測(cè)定分析條件的選擇

時(shí)間：2023-03-25 02:08:22來(lái)源：food欄目：食品快速檢測(cè) 閱讀：

鰻魚及制品中15種喹諾酮類藥物殘留量測(cè)定分析條件的選擇

[db:作者] / 2022-12-19 00:00

11.2.1.7 分析條件的選擇

(1)提取液選擇

喹諾酮類藥物為酸堿兩性物質(zhì)，其提取方法可分為3種主要類型，-種是在中性條件下用有機(jī)溶液萃取，這類藥物也可以在堿性條件下提取，如用氨水乙腈溶液提取，還可以在酸性條件下提取，如采用乙酸乙腈溶液等?；w中的水分對(duì)喹諾酮類藥物的提取有影響，本方法曾先后參照文獻(xiàn)，采用了10%氨水乙腈溶液、1%乙酸乙腈溶液及乙腈進(jìn)行提取，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對(duì)于鰻魚及制品中喹諾酮類藥物的提取，這三種溶劑在提取效率上無(wú)明顯差異，本方法選用乙腈作為提取溶劑。由于鰻魚肉質(zhì)脂質(zhì)含量較高，在提取時(shí)易結(jié)團(tuán)，故需加入無(wú)水硫酸鈉。

(2) 凈化條件選擇

酸-堿液液萃取是凈化喹諾酮類藥物的基本方法，如可通過(guò)調(diào)節(jié)pH后采用氯仿等有機(jī)溶劑萃取以達(dá)到凈化目的。近年來(lái)，固相萃取成為動(dòng)物源性食品中藥物殘留分析的主要凈化方式，有多種商品化固相萃取小柱可以選擇。對(duì)于喹諾酮類藥物，有報(bào)道采用正相固相萃取小柱如氰基柱、氨基柱及離子交換小柱如羧基柱、苯磺酸柱等。近年來(lái)使用較多的凈化方式為將提取溶劑上柱，強(qiáng)陽(yáng)離子交換小柱凈化、氨水甲醇洗脫。

在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)若直接采用乙腈提取液上柱,嘔喹酸、萘啶酸及氟甲喹不能完全被固相萃取小柱吸附，因此，在采用乙腈提取后需要將有機(jī)相換為乙酸銨溶液過(guò)柱凈化以提高回收率。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，采用甲醇即可較完全洗脫嗯喹酸、萘啶酸與氟甲喹，而對(duì)于其他12種喹諾酮類殘留則需要采用氨水甲醇洗脫。在制作了淋洗曲線后，確定了洗脫液先后為1.5mL甲醇、3mL25%氨水甲醇依次洗脫(表11-6)。

表11-6 洗脫液體積與回收率(%)關(guān)系

(3)質(zhì)譜條件優(yōu)化

采用注射泵直接進(jìn)樣方式，以8μL/min將15種喹諾酮類藥物的標(biāo)準(zhǔn)溶液分別注入串聯(lián)質(zhì)譜的離子源中。采用正離子掃描方式進(jìn)行一-級(jí)質(zhì)譜分析，確定了準(zhǔn)分子離子峰(M+1)，優(yōu)化了去集簇電壓。

對(duì)被測(cè)物的準(zhǔn)分子離子碰撞后，進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜分析，得到子離子質(zhì)譜圖，優(yōu)化了碰撞能量，此外，還對(duì)離子源溫度、霧化氣、氣簾氣、輔助氣等參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化。

(4)色譜條件選擇

采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行分析時(shí)，并不要求各組分在液相色譜上進(jìn)行完全分離，但由于氟甲喹與咽喹酸兩種物質(zhì)的相對(duì)分子量-致，且豐度最大的子離子亦-致，因而這兩種物質(zhì)的完全分離尤為重要。本方法選擇了YMC Pack Pro C18柱(150mm×2.1mm，5um)與Agillent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(150mm×4.6mm，5μm)進(jìn)行了試驗(yàn)，選擇了洗脫條件，試驗(yàn)證明，在梯度洗脫條件下這15種物質(zhì)均能較好分離。

(5)喹諾酮類藥物的穩(wěn)定性

喹諾酮類藥物較穩(wěn)定，有資料表明如恩諾沙星、氟甲喹、嗯喹酸、沙拉沙星等藥物在魚皮中濃度含量較高，因而在制樣時(shí)考忠到需要將魚皮與魚肉混合勻漿。鑒于鰻魚皮難以攪碎，因而采用微波加熱的方式。本方法試驗(yàn)了在中高功率(功率為500W)微波加熱30s、1min、1.5min三種條件下喹諾酮類藥物的穩(wěn)定性，試驗(yàn)證明，在該功率下，30s與1min的加熱時(shí)間不會(huì)破壞喹諾酮類藥物的穩(wěn)定性，同時(shí)經(jīng)加熱后魚皮可以容易地與魚肉一并進(jìn)行勻漿，故在樣品制備時(shí)，采用中高功率加熱30s。

喹諾酮類藥物高濃度的貯備液在甲醇中可保存3個(gè)月以上，但水相中低濃度工作液極易降解，應(yīng)臨用時(shí)現(xiàn)配。由于如諾氟沙星等一些喹諾酮類藥物對(duì)光不穩(wěn)定，應(yīng)避光存放，同時(shí)在操作過(guò)程中要盡可能使用棕色玻璃器皿。

另外，試驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)氮吹時(shí)的溫度對(duì)一些喹諾酮類藥物的回收率有影響，溫度過(guò)高回收率有所下降，建議濃縮時(shí)的溫度不超過(guò)40℃。

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