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吡唑酮類藥殘留分析技術(shù)前處理——水解方法

時間:2023-03-25 00:28:06來源:food欄目:食品快速檢測 閱讀:

 

吡唑酮類藥殘留分析技術(shù)前處理——水解方法

[db:作者] / 2022-12-20 00:00

(1)水解方法

吡唑酮類藥物不與組織形成共價鍵結(jié)合,無需酶解或水解。但安替比林的中間代謝物(NORA、OHA、HMA和CBA)由于所含氨基、羧基和羥基與組織蛋白結(jié)合,需要酶解后提取。

Inaba等測定人尿液中安替比林及其代謝物,尿液加入0.5mL檸檬酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)至中性,加入0.1mL β-葡萄糖醛酸酶( 14500U)和硫酸酯酶(4800U),在37℃孵育1h或2h酶解,然后用有機溶劑提取。酶解過程中加入β-葡萄糖醛酸酶抑制劑—D-葡萄糖二酸1,4-內(nèi)酯,則可提取的NORA和OHA大幅減少,表明尿液中NORA和OHA主要與葡萄糖醛酸結(jié)合形式存在。對實際樣本進(jìn)行了測定,氣相色譜法(GC)測定NORA的變異系數(shù)(CV)小于3.1%,HMA的CV為8.9%;尿液中NORA的檢測限(LOD)為1 pg/mL,OHA為10 pg/mL;回收率未予報道。Mikati等測定尿液中安替比林及其代謝物,以氨基安替比林做內(nèi)標(biāo),取1 mL尿液調(diào)節(jié)pH4.8~5.0,加入0.05mL β-葡萄糖醛酸酶,37℃孵育3h酶解,經(jīng)提取凈化后用高效液相色譜(HPLC)測定。HMA、NORA、安替比林、AA和OHA的絕對回收率分別為20%、89%、66%、69%和87%;以AA為內(nèi)標(biāo),HMA、NORA、安替比林和OHA的相對回收率范圍為88%~127%,CV范圍為1.2%~4.1%;定量限(LOQ)分別為8 μg/mL、10 μg/mL、3 μg/mL、10 μg/mL。

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